為了養好細胞,想必每一位科研人都是小心謹慎,可總還是遇到細胞無法貼壁,細胞形態異常,細胞活率低,細胞生長緩慢等問題,這時我們往往會考慮是否培養基/血清改變,試劑保存或使用不當,培養條件不合適,微生物污染,耗材選擇不當...
大家習慣把脆弱的細胞比作襁褓中的嬰兒一點也不為過,縱觀細胞命運,從復蘇-培養-傳代-凍存,小諾總結了細胞“快樂”三要素:
①首先合適的理化環境就像大house,能為細胞提供可靠的定居環境;
②其次質量良好的細胞培養皿/板/瓶等培養耗材就是一張可以舒服睡覺的大床;
③最后培養基、血清、添加劑等就是提供營養的奶粉,是細胞的生命來源。
細胞“快樂”三要素
小為今天總結了一些細胞培養干貨,讓您對細胞培養充滿信心!
我們希望細胞可以“愉快”生長,最終獲得happy Ending,從而為每一個科研人提供可靠的實驗結果。要達到這一目標,三要素都需要優化到最佳條件。作為生物耗材專家,今天小為再從“細胞培養三件套”—培養皿/板/瓶(貼壁培養),來和大家講講,如何選擇合適的培養耗材。
貼壁細胞培養三件套-建諾為耗材篇
1、2D細胞培養
? 貼壁細胞(如293細胞、原代小鼠神經元)
? 懸浮細胞(Jurkat細胞、ExpiCHO-STM細胞)
? 貼壁&懸浮細胞Sf9細胞(貼壁)、Sf9細胞(懸?。?/p>
2D細胞培養延續至今,仍然占據很多優勢。
2、培養表面處理
TC-treated 通過電暈放電或氣體等離子的手段提升聚苯乙烯(PS)表面的親水性,促進細胞表面蛋白質與培養表面結合,可改善細胞貼壁所需蛋白的粘附情況從而幫助細胞貼壁,貼壁細胞培養多選擇表面處理耗材。
貼壁細胞培養耗材規格
? 培養瓶:T25, T75, T175, T225(透氣蓋&密封蓋)
? 培養皿:35mm、60mm、100mm、150mm
? 培養板:6孔、12孔、24孔、48孔、96孔
1、細胞培養瓶那些事..(總有部分細胞無法完全解離下來?邊角細胞無法有效觀察到...)
細胞培養瓶適合長時間細胞培養和大量細胞擴增,瓶口細小,細胞不易污染。
耗材設計需求:
1. 透氣蓋:有利于細胞培養中氣體交換;
2. 密封蓋:可通過擰松平蓋方式培養細胞(含有開關標識),方便長距離運輸。根據細胞對氧氣的需求程度和用途選擇即可。
3.書寫區:便于記錄和識別;
4. 瓶斜頸設計:采用人體工程設計,方便移液管或細胞刮刀接觸生長表面,提高培養瓶的可操作范圍,輕松觸及整個生長表面 √
5. 刻度提示:瓶兩側帶有刻度提示,便于觀察。
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2、細胞培養皿那些事...(戴手套抓握總是要很小心,多個培養培養皿堆疊總不穩,容易打翻...)
細胞培養皿適合培養皿適合中等規模細胞培養,方便吹打,消化和觀察,但要注意防污染。
耗材設計需求:
1. 防濺灑:皿蓋內側的環形圈可防止液體灑濺;
2. 氣體交換:皿蓋內環要保證培養時足夠的氣體交換;
3. 好拿易握:易握型設計,確保拿取培養皿或細胞操作時的安全;
4. 好疊放;
5. 數字標識:便于進行標記和定位;
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3、細胞培養板那些事.....(4/6/12/24孔規格到底怎么選,U底&V型底用途有何不同...)
細胞培養板可靈活選擇通量,并且有多種表面處理方式,包括未處理/TC/PDL包被/low-binding,應用更廣泛。
耗材設計需求:
1. U型底or V型:培養貼壁細胞,通常是選用平底的,這樣便于鏡下觀測、有明確的底面積、細胞培養液面高度相對一致。
2. 多規格可選:一站式滿足實驗不同通量需求(4/6/12/24孔)
3. 表面處理方式:培養貼壁細胞可選擇TC處理表面,表面未處理適合懸浮細胞培養。
4. 好放置及移動;
5. 防滑區,戴手套單手好操作;
6. 數字標記:好定位
7. 防污染:如某些廠家的單方向蓋合設計,并帶有凝聚環,減少污染;
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