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今天，你核酸了嗎？
對于核酸提取的知識你又了解多少？今天小編就給大家分享一些在核酸提取的知識。
一、什么是核酸
核酸是儲存、復制和傳遞遺傳信息的主要物質，主要有DNA和RNA，而核酸提取是分子生物學應用中最基本的步驟之一，是許多實驗的先決條件。提取的核酸質量將直接影響后續實驗檢測的結果。
二、核酸提取的基本步驟
1、裂解細胞，釋放核酸。使用裂解液破壞樣品細胞結構，從而使樣品中的DNA游離在裂解體系中；
2、核酸的分離與純化。需要將與核酸結合的蛋白質以及多糖、脂類等生物大分子和其他不需要的核酸分子去除；
3、核酸的濃縮、沉淀
4、純化核酸。純化則是使DNA與裂解體系中的其它成分，如蛋白質、鹽及其它雜質徹底分離的過程。
圖 核酸分離純化示意圖
三、核酸提取的基本步驟
酚氯仿抽法 | 異硫氰酸胍/苯酚法 | 離心柱法 | 磁珠法 | |
純度 | 較高 | 低 | 高 | 高 |
穩定性 | 低 | 低 | 高 | 高 |
技術要求 | 高 | 高 | 低 | 低 |
操作時間 | 較長 | 長 | 短 | 短 |
表1 幾種核酸提取純化方法比較
1、酚氯仿抽法
此法是DNA提取的經典方法，主要是使用兩種不同的有機溶劑交替抽提將蛋白去除。用苯酚處理勻漿液時，由于蛋白與DNA的聯結鍵已斷，蛋白分子表面又含有很多極性基團與苯酚相似相溶，同時苯酚抑制了DNase的降解作用，蛋白質分子溶于酚相，而DNA溶于水相。離心分層后取出水層，多次重復操作，再合并含DNA?的水相，利用核酸不溶于醇的性質，用乙醇沉淀DNA。離心后，DNA可取出。
2、異硫氰酸胍/苯酚法（Trizol法）
Trizol法是提取RNA的經典方法，在勻質化或溶解樣品中，Trizol試劑可保持RNA的完整性，同時又能破壞細胞及溶解細胞成分。加入氯仿離心后，裂解液分層成水相和有機相。RNA存在于水相中。水相轉移后，RNA通過異丙醇沉淀回收。移去水相后，用乙醇可從中間相沉淀得到DNA，加入異丙醇沉淀可從有機相得到蛋白質。
3、 離心柱法
通過特殊硅基質吸附材料，能夠特定吸附DNA，而RNA和蛋白質順利通過，然后利用高鹽低PH結合核酸，低鹽高PH值洗脫，來分離純化核酸。離心柱純化也是試劑盒提取中廣泛的使用方法。
4、 磁珠法提取
磁珠法不需要離心、無需加入多種試劑，操作簡單，符合核酸自動化提取要求。但是成本較高，科研端使用很難普及。
四、核酸檢測過程中用到哪些耗材
濾芯吸頭、離心管、PCR管、PCR8連排、PCR板、深孔板、封板膜、試劑槽、離心管架等
1. 濾芯吸頭
建諾為吸頭由進口聚丙烯材質制成，濾芯由超高分子量聚乙烯制成。10μl、10μl加長、20μl、200μl、200μl加長、300μl、1000μl、1000μl加長等多種規格可供選擇。96支/盒，滅菌處理，無酶無熱原。
2. 微量離心管
建諾為離心管采用進口聚丙烯材質制成，0.6ml、1.5ml、2ml、5ml、10ml五種規格可選。
0.6/1.5/2/5ml可承受13000G離心力,10ml可承受6000G離心力，管體高透明，便于樣本觀察。袋裝，無酶無熱原，可提供滅菌和低吸附規格。
3.1、建諾為PCR八聯管（0.1ml,0.2ml）
無酶無熱原，顏色（白色/透明），平蓋，還有連蓋款。
3.2、建諾為PCR 96孔板（0.1ml,0.2ml）
無酶無熱原，顏色（白色/透明），裙邊（無裙邊/半裙邊），帶裙邊的PCR板適合在自動化應用中進行處理，裙邊為自動化的機械抓手提供了支撐面積。
3.3、建諾為384孔板（0.1ml）
無酶無熱原，顏色（白色/透明），板上有字母和數字標記，方便標示。
3.4、建諾為PCR封板膜
壓敏膜，對皮膚和手套無粘性，適用于熒光定量PCR檢測。
04. 試劑槽
建諾為試劑槽50ml規格。聚苯乙烯（PS）材質，無菌獨立包裝。單渠 V 型底設計，適合在細胞培養和免疫分析等實驗中與單通道和多通道移液器配合使用，三角引流設計，傾倒更安全。
